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了解IVC系統(tǒng)和超凈工作臺的操作過程實(shí)驗(yàn)詳解

通過對IVC系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)，了解超凈工作臺的使用原理及操作過程，所謂實(shí)踐出真知，只有通過這樣才能增長學(xué)生們的見識及學(xué)習(xí)能力。

【目的與要求】

了解IVC系統(tǒng)和超凈工作臺的原理結(jié)構(gòu)、維護(hù)、操作程序和注意事項(xiàng)。

【儀器與材料】

IVC、超凈工作臺、一次性手套、口罩。

【步驟】

一、師講述IVC系統(tǒng)和超凈工作臺的原理結(jié)構(gòu)、維護(hù)、操作程序和注意事項(xiàng)。

二、學(xué)生在教師指導(dǎo)下進(jìn)行各項(xiàng)基本操作。

【內(nèi)容】

一、原理和結(jié)構(gòu)

IVC籠盒由耐高溫（至少能耐150～160℃高溫以上）的透明塑料材料制成，一套籠盒由上蓋、底盒、食槽、水槽、鎖緊扣、進(jìn)出風(fēng)口組件、硅橡膠密封墊圈等組成有的上蓋上還有一個(gè)稱之為生命之窗的空氣過濾網(wǎng)。獨(dú)立通風(fēng)籠盒是IVC設(shè)備的關(guān)鍵所在，它要具有一定的密閉性，能防止盒外空氣的進(jìn)入，以減少可能的感染來源，又要能讓潔凈空氣流暢進(jìn)入，并在盒內(nèi)形成良好的氣流動或擴(kuò)散，與盒內(nèi)氣體混合并把籠盒內(nèi)的廢氣排出。籠盒一般有兩種基本形式，而且大多申請了專利保護(hù)。一種為籠盒的通排氣是閥門開閉式，即上架時(shí)打開，取下時(shí)自動關(guān)閉。閥門有照相機(jī)快門式和單片彈簧開關(guān)式等。另一種為盒內(nèi)終端過濾保護(hù)式。過濾膜的形式有圓筒狀和平板狀兩種。過濾膜大多為亞高效或高效過濾材料制成。

二、操作程序

1．IVC操作使用前的準(zhǔn)備工作

　　（1）開啟超凈工作臺風(fēng)機(jī)，凈化臺內(nèi)環(huán)境。打開工作燈達(dá)到工作照度。

　　（2）檢查超凈工臺中準(zhǔn)備的各種滅菌飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)物品（飼料、墊料、酸化水及實(shí)驗(yàn)用物）是否齊全。若需更換籠盒。檢查滅菌籠盒準(zhǔn)備情況，并用不銹鋼推車移至超凈臺移門邊。

　　（3）檢查噴霧器噴灑效果及超凈臺內(nèi)外擦抹用的藥液是否已配置好。

　　（4）打開房間內(nèi)排風(fēng)系統(tǒng)。排除打開籠盒時(shí)逸出的有味氣體。

　　（5）檢查IVC機(jī)組各種表頭指針及目視各籠盒內(nèi)的動物情況，估測IVC運(yùn)行情況。

　　（6）記錄影響實(shí)驗(yàn)動物繁殖、生長、發(fā)育的主要環(huán)境參數(shù)，如溫度、相對濕度、日溫差、籠盒內(nèi)外壓差等。

2．IVC操作使用程序及規(guī)范

　　（1）人員帶好一次性口罩、帽子及醫(yī)用乳膠手套。（注意：帶手套前應(yīng)洗凈手及指甲，若指甲太長應(yīng)適當(dāng)修剪，以免戳破醫(yī)用乳膠手套）。

　　（2）用雙手輕輕抬起IVC籠盒外端，沿籠架擱擋向外移出籠盒，放在超凈工作臺旁的不銹鋼小推車上。

　　（3）用藥液噴霧器充分噴灑雙手手套外表及IVC籠盒的外面，消毒滅菌并沾粘住表面的塵埃，防止進(jìn)入超凈臺時(shí)被層流氣體吹揚(yáng)。也可用帶手套的雙手浸入藥液容器中，撈起并擰干藥液毛巾，擦干手套外液滴，同時(shí)擦一下籠盒的外表。

　　（4）打開超凈工作臺移門（高度只要能使籠盒進(jìn)入即可），把籠盒移入超凈工作臺。

　　（5）適當(dāng)拉下超凈工作臺移門（高度只要操作者二手在臺中活動自如即可）。打開IVC籠盒蓋底之間的緊固扣并打開籠蓋。側(cè)臥放在一邊。　

（6）目視籠盒中動物的生活情況，作出添料、加水、換盒、幼仔斷乳分窩及動物實(shí)驗(yàn)的決定，并實(shí)施：

①添加飼料：嚙齒類動物為自由采食（因?qū)嶒?yàn)需要，限量供給除外），采食時(shí)間大多在夜晚，白天目視盒中應(yīng)富余供給。添加時(shí)，用小剪刀剪開輻照料鋁泊包裝，加滿料斗即可，根據(jù)動物的數(shù)量，一般加一次料可維持三天左右。

②添加飲用水：水是動物生存的重要營養(yǎng)要素：動物不能斷食，更不能斷水。嚙齒類動物的飲水量不大，一瓶250ml的水對4～8只小鼠，維持三天足足有余。斷水的主要原因是水瓶或飲水口漏水，防止斷水的關(guān)鍵是選擇優(yōu)質(zhì)水瓶和灌水后瓶蓋的擰緊。打開籠盒。取出水瓶、觀察水瓶中剩余水的水質(zhì)是否混濁，如發(fā)現(xiàn)混濁，立即更換水瓶。換上一瓶已清洗過水瓶并經(jīng)滅菌的飲用水。若剩余水清澈，未發(fā)現(xiàn)有污染的情況。則可使用原飲水瓶，在超凈臺中直接通過龍頭灌裝超濾酸化水，繼續(xù)使用。灌裝畢，關(guān)緊龍頭閥門。防止泄漏，腐蝕超凈工作臺臺面。

③更換籠盒：先將滅菌過的籠盒移入超凈工作臺中，放入適量滅菌墊料，然后打開需換籠盒的金屬網(wǎng)蓋，用消毒滅菌過的大鑷子（鑷頭最好套上一段乳膠管），挾住動物尾巴。把動物移至新的籠盒，蓋上金屬網(wǎng)蓋。加足飼料及飲用水，蓋上盒蓋，扣上緊固扣最后把原籠盒上的動物卡片移插至新的籠盒上。并把換下的籠盒放入專用塑料袋中，扎緊集中外運(yùn)處理。當(dāng)然，更換籠盒也可只換籠盒底盒，不換盒蓋，這要視籠盒的使用情況而定。更換籠盒時(shí)，有時(shí)也可順便檢查一下盒蓋上的終端過濾器情況，并作適當(dāng)處理（互相對換，換膜等）。

④幼仔斷乳分窩：方法同更換籠盒。

⑤動物實(shí)驗(yàn)：按上述方法，打開籠盒蓋，在超凈工作臺內(nèi)再次對帶有乳膠手套的雙手用75%濃度的酒精棉球擦試消毒滅菌，從籠盒中取出動物，放在小動物手術(shù)臺上，麻醉、捆綁四肢、手術(shù)、止血、縫合，或灌藥、注射、采血，或處死、解剖、取標(biāo)本等。實(shí)驗(yàn)完畢，順便檢查一下動物飼料、飲水及籠盒的污染情況。該添就添，該加則加，該換就換，一切視情況而定。

⑥做完超凈工作臺中的飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)工作，蓋好籠盒，打開超凈工作臺的移門，取出籠盒，放在IVC籠架上原位（如需更換位置，則另作別論），對準(zhǔn)籠架進(jìn)出風(fēng)口，沿籠架擱擋，輕輕推入，接口后在籠架固定鈕內(nèi)放下即可。

　　⑦依此操作第二個(gè)籠盒或做下一個(gè)組合的動物實(shí)驗(yàn)。

三、注意事項(xiàng)

1、IVC系統(tǒng)安裝的房間必須符合普通級環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)。

2、房間配有功率適當(dāng)?shù)摹⒛苷{(diào)控溫濕度的空調(diào)設(shè)備。

3、應(yīng)有換氣裝置和供系統(tǒng)使用的排氣管道。

4、配備“萬級”專用超凈臺一臺及噴霧專用噴槍一把。

5、IVC動物實(shí)驗(yàn)室使用的實(shí)驗(yàn)動物，必須來自有生產(chǎn)許可證的實(shí)驗(yàn)動物供應(yīng)單位，并附有相應(yīng)級別的合格證書。在引進(jìn)IVC動物實(shí)驗(yàn)室前，先應(yīng)檢查核對動物運(yùn)輸盒上的各種標(biāo)志（動物品種、品系、規(guī)格、數(shù)量等），并檢查包裝箱及過濾膜有否破損，確認(rèn)一切正確無損，方可移至IVC動物實(shí)驗(yàn)室。

6、實(shí)驗(yàn)器材及小型儀器進(jìn)入屏障系統(tǒng)IVC室，按屏障系統(tǒng)物品進(jìn)入程序規(guī)范進(jìn)行。

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